●PCR、RT-PCR
●PCR反应体系的设定
建议的引物终浓度范围是0.2-0.6μM,TaqMan® 探针的添加量请在终浓度0.05-0.3μM
的范围内调整。扩增效率不理想的情况下,提高添加量可能会改善。相反,过量添加
可能会引起非特异扩增,从而导致检出率降低。
在高速循环及粗样本的检测中,扩增率不理想的情况下,增加酶量(最大2倍),可
以得到改善。
●PCR反应条件的设定
退火/延伸的温度建议设定在在55~65℃的范围。
根据qPCR仪的不同,也可进行高速循环。循环内的变性时间以及退火/延伸
时间最短可设为1秒,请根据实际情况确定合适的反应条件。
●RT-PCR反应[HSTTX-111]
Mn(OAc)2的添加量在最终浓度2.5 mM的基础上,根据RNA样品的浓度及目的片段的序列
进行增减,可以获得更好的效果。
●卓越的DNA扩增效率
以本公司独有的酶TTx DNA Polymerase为基础进行了反应组分的优化。 TTx DNA Polymerase比广泛使用的Taq DNA Polymerase或Tth DNA Polymerase具有更强的延 伸性能,可在短时间的循环条件下进行高效扩增。
●粗样品扩增能力强
在扩增含有PCR抑制剂的粗样品(生物样品材料、土壤、食品等)时性能卓越。血液 等样品无需提取核酸,直接向反应液中进行添加,即可充分扩增。
●可进行高效率的1酶体系・1-step RT-PCR [HSTTX-111]
TTx DNA Polymerase具有很高的逆转录活性,即使微量模板也可高效地进行RTPCR。扩增效率高,短时间的循环条件下也能够高效地扩增。也可用于DNA的检测。
●含有dUTP [HSTTX-101]
本试剂2x Buffer for rTth/ TTx (DNA) 中含有dUTP。通过添加Uracil-NGlycosylase(UNG)*,可防止因携带污染产生的假阳性。
*本品中不含有UNG。
产品内容:
50mM Mn(OAc)2
Hot Start TTx DNA Polymerase(4U/μl)
62.5μl×1支
1ml×1支
2×Buffer for rTth/TTx (DNA)
Hot Start TTx DNA Polymerase(4U/μl)
250μl×1支
1.25ml×2支
2mM dNTPs (dATP, dGTP, dCTP, dTTP)
1ml×1支 5×Buffer for rTth/TTx (DNA/RNA)
62.5μl×1支
活性的定义:
在75℃活性测定条件下,在30分钟内摄入
10nmoles的全核苷酸使成为酸性不溶物
时所需酶的活性定义为1U。
保存条件:
-20℃