流式技术自诞生以来,已逐渐成为生物学、医学以及药物研发等领域中不可替代的分析检测手段。传统流式细胞技术以荧光基团作为待测抗体的标记物,在检测过程中特别是多参数检测过程中势必难以突破荧光重叠的瓶颈,因而限制了检测通量以及由此产生的一系列应用中的问题。
Fluidigm公司基于“Time-of-flight”的质谱流式Helios系统(CyTOF),利用金属元素取代荧光基团作为标记物,从根本原理上解决了这一问题,正以其展现出的强大的创新能力,为人类健康与疾病的研究带来前所未有的突破。
1.设计原理:
区别于市场上常见的流式细胞仪,质谱流式技术采用非放射性的重金属同位素作为抗体的标签,在经过抗体孵育后,细胞被逐个送入等离子炬中进行离子化,使标签金属离子得以释放并被进一步送入飞行时间检测室(time-of-flight chamber)中进行检测,检测器会精确记录设计并换算为各种标签同位素的精确含量,并通过适配软件分析输出数据。
传统流式荧光基团发射光谱图
质谱流式原子质量谱图
2.仪器特点:
基于这一设计原理,Helios质谱流式系统相较于传统方法:
1.信号精确:
高纯度的非放射性金属同位素确保了最低的背景噪音;并且不存在传统方法中荧光重叠的问题,无需进行补偿操作,准确客观地反应数据。
1.拓展了检测通道数:
目前利用Helios质谱流式细胞仪可同时检测40种以上的标记物,同时该技术将检测通道数量扩展到135个,为进一步加入新标签(标记物)做好了准备,充分满足对生物样本全面分析的要求。
2.设计方案灵活:
检测通道数的增加不仅仅扩大了是通量,更重要的是是实验设计更加灵活和完善,通过对细胞表面标记物和内部信号因子的全方位分析,可以帮助科研人员更加精确地进行细胞亚群分析,寻找那些重要的或稀有的未知亚群。
3.研究不再“盲人摸象”:
正是基于质谱流式细胞仪这些创新的技术原理和特点,赋予了其更加强大的生命力,为研究人员的课题设计和执行提供了更多的可能性,除了流式应用中常见的细胞表面标志物检测和免疫学研究等领域,还涉及到了细胞生物学的方方面面,无论从深度、广度还是全面性上都有了大幅的提高,确保了数据的完整性。
4.抗体服务及专业技术支持:
Fluidigm公司目前可以为用户提供几百种金属预标记抗体以及一系列针对具体应用的Panel 试剂盒,这些试剂可以结合组成更大的Panel,对细胞系统进行深入的分析。为了更好地满足用户使用需求,还可提供抗体的个性化定制和标记服务。
同时,公司还为客户提供全套的培训和支持计划,使客户能够快速掌握Helios质谱流式技术要领和使用方法,全身心投入相关领域的研究工作。
通过独创的金属标签抗体,标记细胞表面及胞内蛋白,实现单细胞的多参数分析。
• 135 个检测通道,可同时分析40 种以上的标记物。
• 金属标签种类多,并具有类似的灵敏度,互相之间没有“串色”,实验设计更加灵活;
• 目前已标记的抗体库中有超过600 种抗体,另外还可根据实验需要利用高效稳定的金属标记试剂盒,对抗体进行个性化标记,为您的实验提供更多的可能性。
• 抗体目录不断增加
• 基于“云”的Cytobank 系统,极大的降低了数据分析的门槛,可以方便的使
用SPADE、viSNE 等高级数据处理方法。通道多,可实现40 种以上蛋白的同时检测,从少量样本获取大量有效数据信息。
• 配套多种降维、聚类数据处理方法,可对样本亚群构成、信号通路等进行深入分析。
• 简单易用,仪器自动校准,无需对各个通道进行逐一的补偿校正、电压调节步骤。各种细胞表面标志物的分析CD 分子、主要细胞标志物、干细胞标志物
• 免疫学分析
TCR 抗原表位、细胞因子产生、功能表现型的分析
• 细胞内信号通路分析
探索磷酸化激酶、标记分子和抑制剂
• 细胞周期研究
DNA 合成、细胞周期调控因子、细胞增殖
标志物
• 细胞凋亡研究
Bad、Bax、Bcl2、Caspases 等细胞凋亡
相关分子
• 精细的亚群分析
研究外周血、骨髓、肿瘤等样本的亚群组成